Оценка устойчивости к антибактериальным препаратам популяции N. gonorrhoeae(Калужская область) с использованием молекулярно-биологических методов

Кухарева Е.Н., Беликов А.Н., Терман О.А., Абрамов О.А.

ФГУ ЦНИКВИ Росмедтехнологий, г. Москва, ОКВД, г. Калуга

Цель: оценка маркеров резистентности штаммов гонококка, выделенных от больных гонореей (Калужская область), моле-кулярно-биологическими методами.

Материалы и методы: объектом исследования служила чистая культура гонокока, выделенная от 72 больных гонореей (Калужская область).

Выделение ДНК проводилось термокоагуляционным методом с использованием набора реагентов «ДНК-экспресс» (НПФ «Литех»).

В работе использовались молекулярно-биологические методы: полимеразная цепная реакция с последующей детекцией продуктов амплификации методом горизонтального электрофореза в 2% агарозном геле, реакция минисеквенирования с последующей идентификацией продуктов амплификации на время — пролетном масс-спектрометре — MALDI TOF MS (Bruker Daltonics), определение нуклеотидной последовательности с использованием технологии секвенирования, анализатор Genetic Analyzer 3130 (Applied Biosystems).

Результаты: 8 штаммов N. gonorrhoeae (11,1%) несли в себе ген bla, что свидетельствовало об их высокой резистентности к ß-лактамным антомикробным препаратам (плазмидный механизм развития резистентности); в 64 (88,8%) штаммах ген bla не был обнаружен. О формировании резистентности к пенициллинам говорило также и наличие мутаций по гену ponA (хромосомный механизм развития антибиотикоустойчивости) в 47 (65,3%) штаммах, в 25 (34,7%), мутация не была обнаружена. Присутствие tet детерминанты указывало на резистентность штаммов N. gonorrhoeae к тетрациклинам (плазмидный механизм формирова-ния резистентности) у 3 штаммов (4,2%) и на ее отсутствие у 69 (95,8%) штаммов. Обнаружение мутантного генотипа по гену rps в сочетании с изменениями в гене mtrR говорило о формировании резистентности к тетрациклинам у 21 (29,2%) штамма. Отсутствие мутации по генам rps и mtrR указывало на чувствительность изолятов к тетрациклинам у 51 (42,8%) штамма. Наличие мутантного генотипа по генам gyrA (33 штамма; 45,8%) и parC (22 штамма; 30,5%) свидетельствовало о формировании резис-тентности у данных штаммов к фторхинолонам.

Выводы: полученные результаты свидетельствуют о высокой генетической гетерогенности штаммов N. gonorrhoeae, цир-кулирующих на территории Калужской области, и о формировании устойчивости к пенициллинам, тетрациклинам и фторхино-лонам.