Диагностика состояний вагинальной экосистемы на основе количественной ПЦР в формате мультипрайм

Шипулина О.Ю., Насонова В.С., Савочкина Ю.А. ФГУН «Центральный НИИ Эпидемиологии» Роспотребнадзора, г. Москва  

Инфекционно-воспалительные заболевания влагалища — наиболее частая причина обращения женщин к врачу, т.к. в большинстве случаев они сопровождаются воспалительными реакциями или патологическими выделениями, которые являются причиной дискомфорта и беспокойства пациенток. Ведущее место занимают бактериальный вагиноз (БВ), вульвовагинальный кандидоз (ВВК) и трихомоноз, хотя нельзя исключать инфекции, обусловленные облигатными патогенами. Для лечения БВ и ВВК применяются различные препараты, поэтому постановка правильного диагноза имеет первостепенное значение. Достоверный диагноз невозможно поставить только на основании клинической картины, необходимы точные и быстрые лабораторные методы. До недавнего времени на вооружении у врачей были только микроскопия и ПЦР в качественном варианте выявления ДНК микроорганизма. Согласно результатам многочисленных исследований оба метода по разным причинам не удовлетворяют как по чувствительности, так и по специфичности. Однако в последние годы все чаще для решения этих задач используют ПЦР в количественном варианте, реализованную на основе принципиально новой технологии визуализации амплифицированной ДНК — детекции флюоресцентного сигнала в реальном времени. С помощью этой методики и специального прибора можно точно определять концентрацию как условно-патогенных микроорганизмов, так и концентрацию представителей нормофлоры, что позволяет оценивать соотношение между ними и, соответственно, состояние биоценоза влагалища. Еще одним важным преимуществом новой технологии является возможность одновременного (в одной пробирке) определения нескольких микроорганизмов на разных флюоресцентных каналах. Чем больше каналов детекции у прибора, тем больше микроорганизмов можно выявить. На сегодняшний день наибольшим их числом обладают приборы Rotor Gene 6500/6600 (Corbett Research) — пять/ шесть «неперекрывающихся» каналов флюоресцентной детекции. Для них мы разработали серию тест-систем «ФЛОРОЦЕНОЗ» марки «АмплиСенс». Основная идея, которая была реализована в этих тестах, — одновременное выявление и определение концентрации микроорганизмов — маркеров БВ (Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae, Lactobacillus sp.) и грибов рода Candida — возбудителей ВВК.