Диагностическая эффективность иммуноблоттинга при верификации сифилитической инфекции

Ротанов С.В.

ФГУ «ГНЦД Минздравсоцразвития России», г. Москва

Цель работы: Проведение сравнительной оценки диагностической эффективности исследования сыворотки крови методом иммуноблоттинга в формате линейного иммуноферментного анализа и других регламентированных методов диагностики сифилиса при верификации сифилитической инфекции.

Применяемые методы и технологии: Материалом для исследования служили образцы сыворотки крови 77 пациентов, обратившихся в научно-консультационное отделение ФГУ «ГНЦД Минздравсоцразвития России» в период 2006-2008 годов для обследования на наличие сифилитической инфекции. Для выявления в образцах сыворотки крови антител, ассоциированных с сифилитической инфекцией, были применены регламентированные методы исследования: реакции связывания комплемента с кардиолипиновым (РСКк) и трепонемным антигеном (РСКт), микропреципитации (РМП), пассивной гемагглютинации (РПГА), иммунофлюоресценции (РИФабс/200), иммобилизации бедных трепонем (РИТ), иммуноферментный анализ (ИФА) и иммуноблоттинг (ИБ). Для постановки ИБ применяли набор реагентов «INNO-Lia™ Syphilis Score» производства фирмы «Innogenetics N.V.», Бельгия.

Результаты работы: Наличие и отсутствие трепонемоспецифических антител в образцах сыворотки оценивалось по результатам их исследования в РИФабс и РПГА: при этом положительные результаты были получены с 65 сыворотками крови, отрицательные — с 11; с одним образцом наблюдали слабоположительный результат в РПГА и отрицательный — в РИФабс. При исследовании 65 сывороток крови, содержавших антитела к T.pallidum, положительные результаты в ИФАIgG+M были получены с 58 образцами (чувствительность метода исследования — 89,2%), в РИФ200 — с 38 (58,5%), в РСКт — с 30 (46,2%), в РСКк — с 13 (20,0%), в РМП — с 24 (36,9%), в РИТ — с 25 (38,5%), в ИБ - с 64 (98,5%). С 11 образцами, показавшими отрицательные результаты в РИФабс и РПГА, в других тестах (ИФАIgG+M, РИФ200, РСКт, РСКк, РМП, РИТ, ИБ) во всех случаях также были получены отрицательные результаты исследования (специфичность методов исследования — 100%). Изучение одного образца сыворотки крови, демонстрировавшего слабую реактивность в РПГА и отрицательный результат в РИФабс, дало положительные результаты в РСКт, ИФАIgG+M и ИБ при отрицательных результатах исследования в РИФабс, РСКк, РМП и РИТ.

Вывод. Результаты изучения метода иммуноблоттинга в формате линейного иммуноферментного анализа для выявления антитрепонемных антител показало его высокую диагностическую чувствительность (98,5%) и специфичность (100%), что позволяет рекомендовать данный метод к применению в дерматовенерологических учреждениях, не осуществляющих постановку РИФ и РИТ, в особенности при исследовании образцов с низким содержанием трепонемоспецифических антител.