Роль современных компьютерных технологий в диагностике Т-клеточных злокачественных лимфом кожи

Кардашова З.З., Шабалин В.Н., Василенко И.А., Метелин В.Б., Бабакова С.В.

ФГУ РНИИ геронтологии, г. Москва

Цель: улучшить качество диагностики Т-клеточных злокачественных лимфом кожи (Т-ЗЛК) путем использования экспресс-метода витальной компьютерной морфометрии лимфоцитов периферической крови в дерматологической практике. Материалы и методы: обследовано 12 больных Т-ЗЛК (возраст 25-75 лет, средний возраст 53,7 года). Группы сравнения составили 15 больных с эритродермической формой псориаза (ЭФП) (возраст 19-65, средний возраст 47,3 лет) и 15 соматически здоровых лиц (возраст 27-71, средний возраст 51,1 года). Морфофункциональное состояние лимфоцитов периферической крови изучали методом витальной компьютерной фазовой морфометрии (КФМ) на основе отечественного компьютерного лазерного фазово-интерференционного микроскопа Цитоскан (МГИРЭА, Россия). Метод позволяет анализировать оптико-геометрические показатели (фазовые диаметр, периметр, высоту, площадь, объем) живых клеток, как отдельных, так и всей популяции в целом. О степени активации лимфоцитов судили по изменению их диаметра, периметра и площади. По величинам фазовой высоты и объема количественно оценивали состояние ядерных структур, отражающих пролиферативный потенциал клеток. Комплексный алгоритм морфометрии включал определение оптико-геометрических параметров, статистическую обработку данных, формирование медицинской документации. Полученные данные позволили в рамках одного метода проводить экспресс-оценку субпопуляционного состава, активационного и цитотоксического потенциала циркулирующих лимфоцитов (время исследования образца крови не превышает 30 минут). Полный диагностический комплекс обследования пациентов включал также физикальные, клинические, биохимические, иммунологические, гистологические и микроскопические методы исследования.

Результаты: установлено, что для циркулирующих Т-лимфоцитов периферической крови соматически здоровых лиц средние по популяции значения диаметра, периметра, площади, высоты и объема клеток составляют (М±???7,1±1,1 мкм, 20,9±3,1 мкм, 2,2±0,4 мкм, 32,0±10,1мкм2, 37,6±13,9 мкм3 соответственно. У больных Т-ЗЛК выявлены изменения оптико-геометрических показателей Т-лимфоцитов по сравнению с таковыми у соматически здоровых лиц: увеличение средних значений диаметра, периметра и площади лимфоцитов на 7–10%, снижение фазовой высоты и объема на 26 и 33% соответственно. Компьютерный анализ состояния ядра и структуры живых клеток позволил установить, что характерными особенностями иммунореактивности больных Т-ЗЛК является дисбаланс в Т-хелперной субпопуляции, изменение уровня апоптоза и увеличение цитотоксического потенциала в общей популяции Т- лимфоцитов. Полученные данные коррелировали со степенью тяжести заболевания. У больных ЭФП практически все оптико-геометрические показатели клеток оставались в диапазоне нормальных значений, за исключением величины среднего фазового объема (85,9% от нормы). Выраженных изменений в субпопуляционном составе Т-лимфоцитов, уровне апоптоза и цитотоксической активности клеток не выявлено. Выводы: полученные результаты позволяют считать, что морфометрические параметрыфазово-интерференционных портретов живых лимфоцитов могут служить объективными критериями Т-ЗЛК, а применение в комплексном обследовании больных компьютерной морфометрии, не требующей дорогостоящего оборудования и реактивов, основанной на оперативном получении объективных данных на основе универсальных критериев для оценки морфологических и функциональных показателей клеток с использованием малого объема крови способствует оптимизации диагностики Т-злокачественных лимфом кожи.