Оценка здоровой кожи с помощью прижизненной конфокальной сканирующей лазерной микроскопии

Овчинникова А.Ю., Лукашева Н.Н. , Ткаченко С.Б.

НИИ молекулярной медицины ММА им. И.М.Сеченова, лаборатория по изучению репаративных процессов в коже, Москва

Потекаев Н.Н.

ФППОВ ММА им. И.М.Сеченова, кафедра кожных и венерических болезней, Москва

Современные неинвазивные методы исследования позволяют быстро получать результаты анализа кожи и повторно многократно обследовать определенный участок кожи в отличие от традиционной гистологии. Такие методы намного более безопасны как для врача, так и для пациента, проводятся без повреждения кожных покровов и не причиняют дискомфорта или болевых ощущений. Среди неинвазивных методов наибольшим разрешением обладает прижизненная конфокальная лазерная сканирующая микроскопия, которая позволяет получить изображения не только придатков кожи, но и послойно отличить клетки эпидермиса и дермы, оценить состояние сосудов кожи. Такой метод обследования дает возможность не только объективно определить размер, форму клеток, толщину слоев кожи, но и морфологические клеточные признаки. Прижизненная конфокальная сканирующая лазерная микроскопия позволяет делать тончайшие послойные оптические срезы в плоскости, параллельной поверхности кожи. Именно такой метод может стать основным методом диагностики и контроля лечения в дерматологии.

В лаборатории по изучению репаративных процессов в коже НИЦ ММА им. И.М.Сеченова были изучены различные параметры кожного покрова в зависимости от возраста и фототипа пациентов: толщина рогового слоя, минимальная толщина эпидермиса, количество дермальных сосочков на единицу площади в поле обзора, глубина залегания капилляров с видимым кровоток в сосочковом слое дермы, средний диаметр просвета сосудов и глубина расположения сетчатой системы коллагеновых волокон. В России работ по исследованию кожи in vivo с помощью метода конфокальной лазерной сканирующей микроскопии не проводилось. Более того, в зарубежной литературе не было найдено общей базы данных топографии нормальной кожи с цифровыми показателями, полученными с помощью этого метода, ведь для оценки любой патологии очень важно знать параметры «нормы».

В исследовании приняли участие 20 здоровых добровольцев (5 мужчин и 15 женщин), из них 10 человек со вторым фототипом по Фицпатрику и 10 с третьим. Возраст пациентов варьировался от 18 до 38 лет, средний возраст 27±2. У каждого участника исследования выяснялась инсоляция за последние полгода. Исследование проводилось после получения письменного информированного согласия от каждого пациента. У каждого пациента были изучены три разных области кожного покрова в зависимости от степени воздействия инсоляции: лоб, грудь и внутренняя сторона предплечья. В работе использовался один из последних конфокальных лазерных микроскопов Vivascope 1500 (Lucid Inc, США). Проводилась как визуальная оценка конфокальных срезов, так и количественная. Измерения каждого параметра повторялось не менее пяти раз на одном участке исследования, после чего выводились средние арифметические показателей.

C помощью прижизненной конфокальной сканирующей лазерной микроскопии показаны топографические особенности в строении здоровой кожи у людей различных возрастов с разными фототипами кожи. На участках кожи, подверженных постоянному солнечному излучению, поверхность рогового слоя была ярче, с более выраженным дермоглифом. У людей с третьим фототипом чаще отмечаются яркие скопления гранул над базальной мембраной - меланиновые «шляпки», расположенные над ядрами кератиноцитов. При сравнении структуры сосочкового слоя выявлено, что в областях кожного покрова с частой инсоляцией среднее количество сосочков на единицу площади выше, их диаметр сильно варьируется, а средний диаметр просвета сосудов намного меньше, чем на участках кожи, защищенных от прямых лучей солнца. Также различаются конфокальные снимки коллагеновых волокон на различных участках кожного покрова: в области лба и груди коллагеновые волокна более скопленные и располагаются пучкообразно, тогда как в области предплечья волокна чаще образовывают равномерную сеть.

Среди возрастных изменений строения кожи отмечено, что толщина рогового слоя с годами увеличивается, особенно на участках кожного покрова с частой инсоляцией. Изменяется и структура сосочкового слоя дермы: с возрастом сосочки дермы вытягиваются, уплощаются по высоте, сосочковый слой дермы истончается.

Таким образом, в настоящей работе были оценены возрастные изменения слоев кожи, а также различия строения кожи в зависимости от инсоляции и фототипа методом прижизненной конфокальной сканирующей лазерной микроскопии.