Опыт применения протеомных технологий в изучении сифилитической инфекции

Китаева Н.В., Фриго Н.В., Кубанов А.А., Зиганшин Р.Х., Говорун В.М., Лазарев В.Н.

ФГУ ЦНИКВИ Росмедтехнологий, ФГУ НИИ ФХМ Росздрава, ИБХ РАН, г. Москва

Цель: проведение протеомного профилирования сывороток крови больных сифилисом и лиц, свободных от сифилитической инфекции, и выявление отличий между исследуемыми образцами двух групп пациентов. Материалы и методы: материалом исследования явились 64 сыворотки крови больных сифилисом и лиц, свободных от сифилитической инфекции, депонированные в банке генетических материалов ФГУ «ЦНИКВИ Росмедтехнологий». Из них 32 образца — от больных ранними формами сифилиса, среди которых 30 — до начала специфического лечения, в том числе 17 — от больных с манифестным и 13 — скрытым течением заболевания, и 2 образца — после специфического лечения. 32 об-разца сыворотки крови получены от лиц, не страдающих сифилисом (доноры).

Методом, используемым в протеомных исследованиях, явилась MALDI-TOF масс-спектрометрия с предварительным фрак-ционированием сыворотки крови в системе ClinProt (компания Bruker, Германия). Обсчет результатов проводился с помощью компьютерной программы ClinProtTools, версия 1.0 («Bruker», Германия).

Результаты: в результате протеомного профилирования сывороток крови 17 больных манифестными формами сифилиса (класс 1), у которых поставленный диагноз не вызывал сомнения, и 32 лиц, свободных от сифилитической инфекции (доноров) (класс 2), определены масс-спектры, отличающие исследуемые группы пациентов, которые могут быть расценены как проте-омные маркеры сифилитической инфекции.

При классификации в данной модели масс-спектров 13 сывороток крови больных ранним скрытым сифилисом 9 (69,2%) образцов биологического материала были отнесены к классу 1 (больным сифилисом), а 4 (30,8%) — классу 2 (здоровым). Анамнестические данные (отягощенный соматический статус) и низкая степень позитивности серологических тестов у пациентов, сыворотки которых были отнесены к классу 2, не исключают наличия у данной категории обследуемых «ложноположительных» результатов серологических реакций.

При исследовании сывороток крови 2 пациентов до начала специфического лечения образцы биологического материала были отнесены к классу 1 (больные сифилисом), а образцы сывороток крови этих же пациентов сразу после терапии — к классу 2 (здоровые), что позволяет говорить о возможности применения данного метода для оценки эффективности терапии больных сифилисом.

Выводы: результаты исследования показали различия масс-спектрометрических профилей сывороток крови больных ранними формами сифилиса и пациентов, свободных от сифилитической инфекции, что может явиться основой для создания новых высокочувствительных и специфичных тест-систем для диагностики сифилитической инфекции, а также поможет оценить эффективность проведенного специфического лечения заболевания.