Опыт лечения витилиго с помощью клеточных технологий

Барбинов В.В., Данилов А.О., Сударикова Е.А.

Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова, АПМК «Лекарь», г. Санкт-Петербург

Цель: разработка эффективного метода лечения витилиго с помощью клеточных технологий с использованием культивированных аутологичных кератиноцитов и меланоцитов, а также современной лазеротерапии. Материалы и методы: нами было проведено лечение витилиго методом трансплантации культивированных аутологичных кератиноцитов и меланоцитов у 4 пациенток в возрасте 23-37 лет с длительностью заболевания от 10 до 28 лет. У всех пациенток отмечалась неактивная стадия заболевания (отсутствие появления новых и прогрессирования старых очагов в течение последних 12 месяцев), резистентность к ранее проводимой медикаментозной терапии, отсутствие в течение последних 12 месяцев феномена Кебнера и склонности к образованию гипертрофических и келоидных рубцов. Под местной анестезией была проведена биопсия участка нормально пигментированной кожи поясничной области. Биоптаты были помещены в стерильные пробирки со средой DMEM/F12 и доставлены в лабораторию, где методом трипсинизации эпидермис был отделен от дермы. Аутологичные кератиноциты и меланоциты культивировали в среде DMEM/F12 с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота, глютамина, антибиотиков, эпидермального фактора роста. Культуры клеток выращивали во флаконах в условиях СО2 инкубатора с 5% содержанием СО2 при t 37 °C до получения достаточного по площади монослоя.

Для поверхностной анестезии при трансплантации использовали крем EMLA под пленку на 40 минут. Участки витилиго были

подвергнуты лазерной дермабразии YAG:Er лазером с длиной волны 2936 Нм, плотностью энергии 9,9 Дж/см2, частотой

импульсов 5 Гц и диаметром светового пятна 3 мм. Лазерная шлифовка проводилась до небольшого капельного кровотечения,

что свидетельствовало о достижении сосочкового слоя дермы. После лазерной дермабразии 1-й пациентке на обработанный

участок витилиго была нанесена суспензия культивированных аутологичных кератиноцитов и меланоцитов, 2-й пациентке

— суспензия культивированных аутологичных кератиноцитов и меланоцитов в коллагеновом геле, 3-й пациентке — суспензия

культивированных аутологичных кератиноцитов и меланоцитов в карбопол-геле, а 4-й пациентке проводилась трансплантация

культивированных аутологичных кератиноцитов и меланоцитов, выращенных в виде монослоя на гидрогелевой повязке Аквафло

(Kendall). Все операции заканчивались наложением атравматичной асептической повязки Телфа (Kendall). Смена повязки осуществлялась через 7 дней после трансплантации. Обработка ран проводилась стерильным вазелином. Через 14 дней повязка снималась, и рана велась открытым способом с обработкой стерильным вазелином в течение недели. Полная эпителизация наблюдалась у 1-й пациентки через 3,5 недели после трансплантации, у 2-й пациентки — через 2 недели, а у 3-й и 4-й — через 2,5 недели после трансплантации.

Результаты: у всех 4 пациенток наблюдалось полное приживление культуры аутологичных кератиноцитов и меланоцитов. Побочных явлений, таких как возникновение рубцов, феномена Кебнера, присоединение вторичной инфекции, замечено не было. У 1-й пациетки через 3 месяца после трансплантации наблюдалось появление первых островков репигментации на пересаженном участке. Все 4 пациентки находятся под наблюдением для оценки результатов трансплантации и возможности дальнейшего применения лазеротерапии для стимуляции репигментации в пересаженных участках. Выводы: метод трансплантации культивированных аутологичных кератиноцитов и меланоцитов является перспективным альтернативным методом терапевтического лечения витилиго у пациентов со стабильным течением заболевания и резистентностью к ранее проводимой медикаментозной терапии. Наиболее успешным по срокам полного заживления и достижения эффективного результата оказался метод трансплантации культивированных аутологичных кератиноцитов и меланоцитов в коллагеновом геле.