Изучение специфичности тест-системы «Амплисенс N.gonorrhoeae — РИБОТЕСТ» для выявления РНК N.gonorrhoeae на основе реакции транскрипционной амплификации НАСБА при исследовании материала из ротоглотки

Гущин А.Е., Рыжих П.Г., Цеслюк М.В., Шипулин Г.А.

ФГУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, г. Москва

Цель: изучение специфичности тест-системы «Амплисенс РИБОТЕСТ» и отсутствия перекрестной реакции с различными представителями рода Neisseria.

Материалы и методы: материалом для исследования служили образцы отделяемого орофарингеальной области, полученные с помощью ватного тампона от 81 взрослого человека, которые помещались в транспортную среду, входящую в состав тест-системы. Из полученного материала были выделены нуклеиновые кислоты (НК). Каждый образец НК был исследован с помощью реакции транскрипционной амплификации НАСБА. Параллельно была проведена ПЦР каждого образца с использованием праймеров, обеспечивающих амплификацию фрагментов 16S-рибосомальной ДНК всех видов, входящих в род Neisseria. С помощью реакции секвенирования определяли нуклеотидные последовательности полученных ПЦР-фрагментов, после чего проводили филогенетический анализ с использованием международного банка генетической информации GenBank и программного обеспечения BLAST.

Результаты: исследования показали, что продукт ПЦР-реакции с родоспецифическими праймерами был получен из 80 (99%) орофарингеальных образцов. Секвенирование и последующий филогенетический анализ показали, что ни в одном образце не присутствовала ДНК N.gonorrhoeae. В то же время была обнаружена ДНК N.meningitidis в 4 (5%) образцах, а в других образцах присутствовала ДНК N.flava, N.sicca, N.mucosa, N.perflava, N.subflava и др., причем преимущественно в виде полимикробных ассоциаций. Все результаты, полученные с помощью тест-системы «Амплисенс Neisseria gonorrhoeae — РИБОТЕСТ», были отрицательными, т. е. ни в одном случае не было зарегистрировано перекрестной реакции амплификации с РНК негонококковых видов нейссерий.

Выводы: полученные результаты показывают высокую специфичность тест-системы «Амплисенс Neisseria gonorrhoeae-РИБОТЕСТ» и дают основание для дальнейшего изучения возможности ее использования при диагностике гонококковой инекции экстрагенитальной локализации.