Биткина О. А.
ГОУ ВПО НижГМА, г. Нижний Новгород
Цель: изучение взаимосвязи местного иммунного статуса и течения ожоговой болезни. Материалы и методы: 14 пациентам Российского ожогового центра проведено иммуногистохимическое исследование био-птатов рубцовой ткани с целью изучения количества и характера распределения иммунокомпетентных клеток в эпидермисе и дерме. Для оценки показателей местного иммунитета в биоптатах рубцовой ткани проводился анализ топографии и содержания Т-лимфоцитов (CD3-позитивные клетки), а также корецепторов CD4 и CD8, распределения и количественной характеристики В-лимфоцитов в патологически измененной коже, CD 25-положительных клеток, топографии и содержания в коже внутриэпи-дермальных макрофагов (клеток Лангерганса). Использовались тест-наборы фирмы «МедБиоСпектр» г. Москва и тест-системы фирмы DAKO®. Определение содержания Т-лимфоцитов и субпопуляции Т-клеток (Т-хелперы и супрессорно-цитотоксические Т-лимфоциты) было проведено методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием МКА ИКО-90, ИКО-86 и ИКО-31 (к CD3, CD4 и CD8 антигенам соответственно).
Подсчет числа Т-лимфоцитов и субпопуляций Т-клеток в эпидермисе проводили в расчете на 1000 эпидермоцитов.
Результаты выражали в промиллях.
Изучение числа В-лимфоцитов в коже проводили в расчете на 1000 эпидермоцитов методом непрямой иммунофлюорес-ценции с использованием МКА ИКO-91 к маркеру CD22.
Изучение экспрессии ИЛ-2р иммунокомпетентными клетками в коже проводилось методом иммунофлюоресценции с ис-пользованием МКА ИКO-105 к CD25-антигену.
Исследование топографии и количественной характеристики резидентных макрофагов (клеток Лангерганса, КЛ) в коже проводилось иммуноферментным методом с использованием стрептавидин-биотиновой технологии (наборы с системой Universal DAKO LSAB 2 kit, Peroxidase) и МКА к S100-протеину.
Результаты: при исследовании биоптатов рубцов выявлено преимущественное расположение Т-лимфоцитов и их хелперной и супрессорной субпопуляций в эпидермисе. Однако у 37,5 % пациентов обнаружены скопления Т-лимфоцитов в дерме вокруг капиллярных венул, у 3 пациентов наблюдалась исключительная локализация Т-лимфоцитов в дерме. Уровень содержания Т-лимфоцитов в эпидермисе выявил резкое, статистически достоверное снижение по сравнению с показателями контрольной группы (соответственно 6,47 ± 2,95 % и 19,6 ± 0,6 %, р<0,001). Изучение хелперной и супрессорной субпопуляций также показало их снижение, в случае CD8 приближающееся к статистически достоверному. В нормальной коже CD22-позитивные клетки в эпидермисе в большей части биоптатов отсутствовали, размещаясь в 3-4 ряда вокруг посткапиллярных венул в дерме. Лишь у четырех человек (14,3%) в контрольной группе наблюдалась слабая по интен-сивности иммунофлюоресценция В-лимфоцитов в эпидермисе, которые локализовались в базальном слое и супрабазально. В рубцовых биоптатах присутствие В-лимфоцитов в эпидермисе удалось определить у 6 пациентов (43 %). Их средний уровень (8,88±4,45 %) превышал показатели группы контроля (до 6,4 %). В дерме у 4 пациентов наблюдалось ясное свечение вокруг капиллярных венул.
Изучение коэффициента корреляции между В-лимфоцитами и субпопуляциями Т-лимфоцитов не выявило выраженных отличий по сравнению с контрольной группой.
В коже здоровых лиц (контрольная группа) клетки, экспрессирующие ИЛ-2р, локализовались в базальном слое или супра-базально. В дерме были обнаружены редкие скопления CD25-позитивных иммунокомпетентных клеток, большая часть которых располагалась в 2-3 ряда вокруг посткапиллярных венул поверхностного сосудистого сплетения и придатков кожи. В эпидермисе рубцовых биоптатов CD25+ лимфоциты были найдены лишь у одного пациента (2,8 % при контрольных зна-чениях до 14 ‰). В дерме у 6 пациентов наблюдалось незначительная интенсивность свечения вокруг капиллярных венул. Выводы: проведение иммуногистохимических исследований биоптатов рубцовых тканей послеожоговых пациентов выявило угнетение Т-клеточного звена SALT. На основании изучения ИРИ и высокого коэффициента корреляции между CD3+ и CD8+ лимфоцитами можно сделать заключение о преимущественной активации супрессорного звена в формировании рубцовых тка-ней. Исследование клеток Лангерганса показало их активное взаимодействие как с Т-клеточным, так и с гуморальным звеном иммунитета в коже послеожоговых больных.