ВОЗМОЖНОСТИ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ КЛИНИЧЕСКОГО ОТВЕТА НА ЛЕЧЕНИЕ БОЛЬНЫХ ПСОРИАЗОМ ИНФЛИКСИМАБОМ НА ОСНОВЕ ПРОВЕДЕНИЯ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Каганова Н.Л., Фриго Н.В., Знаменская Л.Ф., Яковлева С.В., Бутарева М.М., Жилова М.Б., Ротанов С.В.

ФГУ «ГНЦД Росмедтехнологий», г. Москва

Цель исследования: Поиск молекулярных маркеров эффективности и безопасности лечения больных псориазом, получающих терапию препаратом инфликсимаб, для создания персонализированного подхода к назначению лечения.

Методы и технологии: Для реализации поставленной цели исследования в ФГУ «ГНЦД Росмедтехнологий» было проведено секвенирование гена TNF-α и его промоторной области, секвенирование первого экзона гена TNF-R-I и промоторной области данного гена и рестрикционный анализ гена TNF-R-II в позиции 196 G/T (rs 1061622) на выборке 28 больных псориазом, получающих терапию препаратом инфликсимаб.

Результаты: На первом этапе проведения молекулярно-генетических исследований был оптимизирован протокол экстрагирования ДНК из биоптатов кожи: 1) гомогенизация биоптатов кожи механическим способом при высокоскоростном движении (30 ударов/c) специальных металлических шариков с использованием автоматической станции для разрушения и гомогенизации биологических образцов TissueLyser II (фирма QIAGEN, Германия), 2) энзимно-детергентная обработка с использованием додецилсульфата натрия (ДСН) и протеиназы К и 3) выделение ДНК из лизатов с использованием коммерческого набора реагентов DiatomTM DNA Prep 100 (фирма IsoGen, Россия).

При секвенировании промоторной области гена TNF-α у подавляющего большинства больных псориазом изолированно или в сочетаниях были обнаружены следующие замены нуклеотидов (цифрами обозначена позиция, в которой произошла замена, относительно сайта начала транскрипции): -861 Т на С (генотип СС), -859 А на Т (генотип TT), -857 С на Т (генотип TT),-572 С на А (генотип AA). У нескольких больных изолированно или в сочетаниях обнаружен генотип GA в позиции -238, у а одного больного — генотип GA в позиции -376. У одного пациента замен обнаружено не было. При проведении секвенирования гена TNF-α у пациентов изолированно или в сочетаниях были обнаружены следующие замены нуклеотидов: 478 G на A (генотип AA), 1164 С на T (генотип TT), 1293 A на G (генотип GG), 1371 А на G (генотип GG), 2729 T на G (генотип GG). У нескольких больных изолированно или в сочетаниях обнаружен генотипы GA в позиции 409 и генотип GA в позиции 478, у одного больного — генотип GA в позиции 840, у одного больного — генотип CT в позиции 1213, у одного больного — генотип AG в позиции 1293. У части пациентов (7 человек) замен обнаружено не было.

При секвенировании промоторной области гена TNF-R-I у подавляющего большинства больных псориазом обнаружена замена нуклеотидов T на G в позиции -609 (генотип GG). Лишь у двух пациентов данная замена не обнаружена (генотип TT). При секвенировании первого экзона гена TNF-R-I у большинства пациентов обнаружен генотип AG в позиции 317, у пяти больных — генотип АА, у двух больных — генотип GG.

При проведении рестрикционного анализа гена TNF-R-II у девяти пациентов обнаружен генотип GG в позиции 196, у одиннадцати больных — генотип TT, у одного пациента — генотип GT.

Выводы: При сравнительном анализе полученных данных и клинической характеристики больных псориазом могут быть обнаружены некоторые закономерности, позволяющие прогнозировать терапевтическую эффективность планируемого лечения.