Сравнительное изучение частоты выявления ДНК, мРНК и антигенов M. hominis и U. urealyticum в клиническом материале от гинекологических и урологических больных

Бархатова О.И., Балабанов Д.Н., Растегаева И.Н.

ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва

Цель работы — проведение сравнительного изучения частоты выявления антигенов, ДНК и мРНК M. hominis (Mh) и U. urealyticum (Uu) в сыворотке крови и соскобе из УГТ больных с гинекологическими и урологическими заболеваниями. Применяемые материалы и методы: Антигены возбудителей определяли в реакции агрегатгемагглютинации (РАГА) в сыворотке крови больных. ДНК и мРНК выявляли методом ПЦР и обратной транскрипции (ОТ) в сыворотке крови и содержимом соскобов из УГТ. Результаты работы: Сравнительный анализ частоты выявления ДНК исследуемых возбудителей в соскобах из УГТ и сыворотке крови показал, что ДНК как Mh, так и Uu чаще обнаруживается в соскобах из УГТ, чем в сыворотке крови больных. Так ДНК Mh выделена в 37,4% случаев из соскобов и в 20,7% случаев из сыворотки крови, Uu в 46,3% и 4% случаев соответственно. В соскобе из УГТ ДНК Uu выявляется чаще (46%), чем Mh (37%). Однако в сыворотке крови наблюдается обратное соотношение — ДНК Mh обнаружена в 21% случаев, тогда как ДНК Uu лишь у 4% обследованных. Сравнение результатов частоты выявления антигенов и ДНК возбудителей в сыворотке крови обследованных больных показало, что антигены обоих возбудителей обнаруживаются с большей частотой, чем ДНК. Так, антигены Mh выявлены в 43% случаев, антигены Uu в 36,3%. ДНК Mh выделена в 15% случаев, ДНК лишь у 2,2% обследованных. Результаты выделения ДНК из материала соскобы из УГТ были несколько выше. Так ДНК Mh выявлена у 18,5% обследованных, Uu — в 24,4% случаев. Клинический материал, содержащий ДНК исследуемых возбудителей использовали для выделения из него мРНК. Анализ полученных результатов показал, что мРНК Mh в материале из УГТ выявлялась у 43,7% обследованных в сыворотке крови в 14,2% случаев. Для Uu эти показатели были значительно ниже 10,5% и 7,5% соответственно.

Вывод: Высокая частота выявления антигенов Mh и Uu возможно объясняется их способностью длительно сохраняться в инфицированном организме. Длительность сохранения антигена может быть связана с персистенцией живых клеток возбудителя в макроорганизме в каких-то неизвестных пока очагах с последующим поступлением антигенов в кровь. Природа антигенемии изучается нами в настоящее время. Неоспоримым доказательством присутствия возбудителя в организме больного могут быть или выделение его из клинического материала или выявление его мРНК, наличие которой может свидетельствовать об активной экспрессии генов. Низкие показатели частоты выявления мРНК по сравнению с ДНК исследуемых возбудителей могут быть следствием методических погрешностей (по данным разработчиков тест систем для выделения мРНК возможна потери до 50-80%). Это может быть также связано с тем, что фрагменты мРНК имеют короткий срок существования. Кроме того, разница в частоте выявления ДНК и мРНК, возможно, объясняется тем, что ДНК или ее фрагменты способны сохраняться в макроорганизме в течение длительного периода после заболевания. Об этом свидетельствуют результаты наших опытов по длительности сохранения ДНК в организме экспериментально инфицированных животных. Так в органах кроликов ДНК Mh в ПЦР выявлялась до 2 месяцев, в органах мышей она сохранялась 2 недели.