ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИЗОТРЕТИНОИНА В ТЕРАПИИ ПСОРИАЗА

Владимирова Е.В., Лига А.Б.1, Ухина Т.В.1

1 Институт повышения квалификации ФМБА России, РГМУ

ВВЕДЕНИЕ. В настоящее время большинство исследователей определяют псориаз как заболевание мультифакториальной природы, относящееся к наследственно детерминируемым, системным заболеваниям человека которое имеет многие при знаки аутоиммунного заболевания, связанного с аутоагрессией Тклеток. Особое место в этиопатогенезе заболевания отводится также изменениям микроциркуляторного русла, активности перекисного окисления липидов (ПОЛ) и показателей антиоксидантной системы (АОС) (В. А. Молочков, В. В. Бадокин и др., 2007). Данные литературы о состоянии оксидантноантиоксидантной системы у больных псориазом весьма противоречивы. По свидетельству одних авторов (М. Б. Трофимова и др., 2004; Е. Н. Костянова, 2005), у больных псориазом наблюдается повышение ПОЛ с неадекватным ответом АОС, другие (В. Н. Шилов, В. И. Сергиенко, 2000; Б. С. Хышиктуев и др., 2000) отмечают снижение ПОЛ и повышение уровня антиокислительной защиты. Кроме того, существует предположение о том, что пусковые события при развитии псориаза могут быть связаны с воспалением в дерме, тогда как эпидермис вовлекается в процесс вторично (E. Chrystofers, C. Schubert и соавт., 1987). Первичность изменений дермы в генезе псориаза согласуется с установленной ролью в межклеточной кооперации фибробластов как активных участников дифференцировки и формирования специфичности эпидермиса, одновременно являющихся соматическими и иммунокомпетентными клетками (A. Barecca, M. De Luca, 1992; И. В. Константинова, Г. Д. Урсо и др., 1996). В последнее время широкое применение в разных областях медицины находят клеточные культуры, в частности фибробласты (Ю. К. Скрипкин, А. А. Кубанова и др., 1994; C. L. Barker, M. T. McHale и соавт., 2004). Значительный интерес представляет возможность использования культуры фибробластов кожи для дальнейшего изучения биохимических аспектов патогенеза псориаза, а также для проведения скрининга новых лекарственных соединений для терапии этого дерматоза. В лечении псориаза применяются препараты группы ароматических ретиноидов, прежде всего ацитретин (В. А. Молочков, В. В. Бадокин и др., 2007). Тем не менее, обладая высокой эффективностью в терапии этого заболевания, ацитретин имеет серьезные противопоказания, а также различные нежелательные эффекты, прежде всего тератогенность. Женщинам детородного возраста необходима эффективная контрацепция во время курса лечения ацитретином, а также в течение последующих 2 лет. Другой препарат этой группы — изотретиноин, который широко применяется в терапии акне, имеет более короткий период по лувыведения по сравнению с ацитретином. Доказано, что уже через месяц после окончания приема изотретиноина отсутствует тератогенный риск. В зарубежной литературе (Фицпатрик, 1999) есть отдельные упоминания о применении изотретиноина при псориазе, однако нет данных, каким образом препарат оказывает антипсориатическое действие.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Оценить in vitro влияние ретиноидов (ацитретина, изотретиноина) на состояние антиоксидантной редокссистемы глутатиона (со держание восстановленного глутатиона, активность глутатионредуктазы и глу татионпероксидазы) в фибробластах кожи пациентов с псориазом в сравнении с фибробластами интактной кожи человека.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. Материалом для исследования служили биоптаты кожи, полученные от 30 здоровых пациентов, полученных в результате пластических операций (13 мужчин и 17 женщин в возрасте от 24 до 52 лет) и от 30 больных псориазом (16 мужчин и 14 женщин в возрасте от 26 до 50 лет). У больных были диагностированы распространенный вульгарный псориаз в стадии обострения (17 человек) и экссудативный псориаз (13 человек).

В работе использовали культуру фибробластов, поддерживаемую пассированием в стеклянных сосудах Карреля. Культивирование фибробластов осуществлялось по методу Р. Фрешни (1989) в стерильных условиях с использованием ламинарбокса ЛБВ (Россия). Клетки инкубировались при 37 оС в условиях 5 % СО, использовали стандартную среду DMEM («ПанЭко») с добавлением 10 %ной эмбриональной телячьей сыворотки («ПанЭко»), 100 мкг / мл Lглутамина (НИИ ЭиМ им. Н. Ф. Гамалеи) и 40 мкг / мл гентамицина сульфат («Верофарм»). Коли чество и жизнеспособность клеток оценивали в камере Горяева в присутствии 0,1 %ного раствора трипанового синего. Исследование соединений (ацитретин, изотретиноин) проводили в опытах in vitro. Растворы ретиноидов добавляли к гомо генатам в конечных концентрациях 10– 7, 10– 5 и 10– 3 М. В гомогенатах определяли содержание восстановленного глутатиона (GSH), активность глутатионредуктазы (GSHred) и глутатионпероксидазы (GSHper).

РЕЗУЛЬТАТЫ. В качестве контроля использовались параметры редокссисте мы глутатиона в фибробластах интактной кожи человека без воздействия иссле дуемых препаратов (табл.1), затем проводилась серия экспериментов с ацитрети ном и изотретиноином в конечных концентрациях 10– 7, 10– 5 и 10– 3 М.

Ацитретин и изотретиноин достоверно (р < 0,05) повышают содержание GSH, увеличивают активность GSHred и GSHper после инкубации с суспензией интактных клеток кожи мужчин и женщин в концентрациях 10– 3, 10– 5 М. При этом уровень глутатиона в норме выше у женщин, чем у мужчин. Отсутствуют статистически значимые различия воздействия ацитретина и изотретиноина на показатели редокс системы глютатиона в исследовании на фибробластах интактной кожи человека.

Далее изучались параметры редокссистемы глутатиона в фибробластах кожи пациентов с псориазом без воздействия ретиноидов, затем проводилась серия экспериментов с ацитретином и изотретиноином в конечных концентрациях 10 – 7, 10 – 5 и 10 – 3 М.

При сравнении полученных данных с результатами ранее проведенных исследований на фибробластах интактной кожи выяснено, что значения отдельных компонентов редокссистемы глутатиона в фибробластах при псориазе в 2,5 раза ниже, чем таковые в норме. Установлено, что и ацитретин, и изотретиноин досто верно (р < 0,05). повышают содержание GSH, увеличивают активность GSHred и GSHper после инкубации с суспензией клеток кожи при псориазе у мужчин и женщин в концентрациях 10– 3, 10– 5 М. При этом уровень глутатиона в фибробластах при псориазе ниже у женщин, чем у мужчин. Отсутствуют статистически значимые различия между ацитретином и изотретиноином на показатели редокс системы глютатиона в исследовании на фибробластах кожи при псориазе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Полученные данные свидетельствует о наличии у ацитретина и изотретиноина антиокислительных свойств, присущих противовоспалительным препаратам. Отсутствие статистически значимых различий между ацитретином и изотретиноином на показатели редокссистемы глютатиона в исследовании на фибробластах кожи при псориазе позволяют предположить наличие положительного терапевтического эффекта изотретиноина в клинической практике при этом дерматозе.