Молекулярно-генетический анализ мутагенного действия ультрафиолетовой терапии у больных псориазом

Жилова М. Б., Фриго Н. В., Волков И. А., Знаменская Л. Ф., Лесная И. Н., Кубанов А. А., Волнухин В. А., Яковлева С. В.

ФГУ ГНЦД Росмедтехнологий,

г. Москва

Введение. Ультрафиолетовая терапия является одним из наиболее эффективных методов лечения больных псориазом. Однако длительное многокурсовое ультрафиолетовое облучение может привести к ряду серьезных побочных эффектов, включая развитие злокачественных новообразований и преждевременное старение кожи. Одной из возможных причин развития отдаленных побочных эффектов УФ-облучения является его мутагенное воздействие на клеточную ДНК, что, в свою очередь, может приводить к возникновению и накоплению мутаций и нарушению синтеза белков. Основной системой, удаляющей повреждения ДНК, индуцируемые ультрафиолетовым излучением, является эксцизионная система репарации нуклеотидов. Мутации, возникающие в генах, ассоциированных с эксцизионной системой репарации ДНК, потенциально могут явиться причиной нарушений в функционировании этой системы и способствовать развитию побочных эффектов УФ-терапии.

Цель исследования: оценка мутагенного действия ультрафиолетовой терапии у больных псориазом путем изучения клинически значимых мутаций и полиморфизмов в генах, ассоциированных с эксцизионной системой репарации ДНК (XPC; XPD; XPF).

Материалы и методы. Обследовано 87 больных псориазом, получавших ПУВА-терапию или средневолновую ультрафиолетовую терапию. В зависимости от количества проведенных курсов УФ-терапии больные были разделены на 2 группы: 1-ю группу составили пациенты, ранее не получавшие фототерапию (n = 24), 2-ю группу составили больные, которым ранее было проведено 3 и более курсов фототерапии (n = 63). С целью изучения клинически значимых мутаций, которые могут возникнуть в генах, ассоциированных с эксцизионной системой репарации ДНК, под влиянием УФ-терапии, а также полиморфизмов данных генов больные были обследованы до и после проведения очередного курса фототерапии. В качестве биообразцов использовались образцы крови (до лечения) и биоптаты кожи (после курса УФ-терапии). Исследование проводилось с помощью методов молекулярно-генетического анализа, который включал выделение ДНК из биообразцов путем ее лизиса и активной сорбции на сорбенте; амплификацию и секвенирование функционально значимых участков генов XPC; XPD; XPF с последующей обработкой данных с помощью программ Sequencing Analysis 5.2 и Seqscape v. 2.5.

Результаты. Как до, так и после курса ультрафиолетовой терапии у больных псориазом были выявлены идентичные изменения структуры фрагментов генов, ассоциированных с эксцизионной системой репарации ДНК, которые характеризовались наличием нуклеотидных замен в позициях 32724 С>А, 32864 T>C, 32828 С>G, 33343 Т>A и 33350 A>G гена XPC и в позициях 27945 T>C и 28095 G>A гена XPF. Достоверных различий в молекулярной структуре изученных генов у больных псориазом 1-й и 2-й групп выявлено не было. Отсутствие различий в частоте выявленных нуклеотидных замен у больных псориазом до и после проведения курса ультрафиолетовой терапии, а также в результате многокурсового лечения, позволило сделать заключение об отсутствии клинически значимых мутаций в изученных фрагментах генов, ассоциированных с эксцизионной системой репарации ДНК у больных псориазом под влиянием ультрафиолетовой терапии. Планируется проведение дополнительных молекулярно-генетических исследований по изучению генетического полиморфизма ряда других локусов генов, ассоциированных с эксцизионной системой репарации ДНК, и их возможного влияния на эффективность и безопасность УФ-терапии.