Исследование эффективности метода иммуноблоттинга (тест-система линейного иммуноферментного анализа «INNO- LIA™ SYPHILIS SCORE») у больных ранними формами сифилиса и у лиц, бывших в половом контакте с больными сифилисом

Фриго Н.В., Дударева Л.А., Ротанов С.В., Топоровский Л.М., Иванов А.М.

ФГУ ЦНИКВИ Росмедтехнологий, ГКБ №14 им. В. Г. Короленко, ВМА им. С. М. Кирова.

Цель: сравнительноеизучение чувствительности метода иммуноблоттинга (ИБ) и других серологических реакций (РМП, РСК, РПГА, ИФА, РИФ) при диагностике начальных периодов сифилитической инфекции и у лиц, находящихся в возмож-ном инкубационном периоде. Исследование проведено на базе референсной серологической лаборатории ФГУ «ЦНИКВИ Росмедтехнологий».

Материалы и методы: протестированы сыворотки крови 210 пациентов. Часть из них (110 человек) составила опытную груп-пу, в которую вошли больные первичным (46 человек), вторичным (25 человек) и скрытым ранним сифилисом (25 человек), а также лица, бывшие в половом контакте с больными заразными формами сифилиса (ЛБПК, 14 человек). Группу контроля (100 человек) составили лица, свободные от сифилитической инфекции: 50 больных дерматозами и 50 доноров. Диагноз сифилиса был подтвержден результатами клинического обследования, положительным результатом комплекса серологических реакций (РМП, РСК, РПГА, РИФ, ИФА) и данными темнопольной микроскопии (ТПМ). Параллельно проводились исследования методом иммуноблоттинга (коммерческая тест-система «ИННО-Лиа Сифилис усовершенствованный» «INNO — Lia™ Syphilis Score» производства фирмы «Innogenetics N.V.», Бельгия).

Результаты: при обследовании больных первичным сифилисом стандартными серологическими методами наименее чувс-твительной оказалась РСК с кардиолипиновым антигеном (положительный результат получен в 65±7,6% случаев). Несколько более чувствительными оказались другие реакции комплекса серологических реакций: РСКт (87,5±5,3%) и РМП (88,6±4,9%). Наиболее чувствительными из серологических тестов оказались трепонемные тесты: РИФабс — 100%, ИФА — 97,7±2,3 % и РПГА — 97,4±2,6%. Чувствительность иммуноблоттинга при первичном сифилисе первоначально была определена как 97,8 %.

При этом у 1 пациента с отрицательным результатом ИБ был выявлен факт неправильного хранения материала перед иссле-дованием, при повторном обследовании больного с исследованием новой порции крови был получен положительный результат ИБ, что позволило сделать вывод о 100%-ной чувствительности метода ИБ. У больных вторичным сифилисом результаты всех серологических методов (РСК, РМП, РПГА, РИФабс, ИФА, а также иммуноблоттинга оказались положительными (100%-ная чувствительность),что соответствовало современным представлениям о развитии на вторичной стадии сифилитической инфек-ции максимального иммунного ответа организма больных к T. pallidum и свидетельствовало о нецелесообразности использовать метод иммуноблоттинга для диагностики этой стадии инфекции. При скрытом раннем сифилисе чувствительность РМП и РСКк составила 92,0±5,5%, РСКт -96,0±4,0 %. Чувствительность РПГА, РИФабс и ИФА составила 96,0±4,0%. При обследовании больных скрытым ранним сифилисом методом иммуноблоттинга положительные результаты были получены у всех пациентов (100%- ная чувствительность). При обследовании лиц, бывших в половом контакте с больными сифилисом, положительный ре-зультат в иммуноблоте был получен у 36 % пациентов (5 человек). Кроме ИБ положительный результат был выявлен также в РМП (7% — 1 чел.) и ИФА (21% — 3 чел.), в то время как другие реакции (РСКТ, РСКК РИФабс и РПГА) оказались отрицательными. Таким образом, иммуноблоттинг оказался наиболее чувствительной реакцией, позволяющей устанавливать инфицированность у лиц, бывших в половом контакте с больными сифилисом.

При тестировании сывороток крови лиц без указаний на наличие сифилитической инфекции (100) все 50 сывороток крови от больных кожными заболеваниями и 48 сывороток крови, взятых от доноров крови, показали отрицательные результаты. У двух доноров были зарегистрированы положительные результаты имуноблоттинга с невысокими уровнями позитивности реакции с отдельными рекомбинантными белками (на уровне 1-2+). Последующее обследование этих пациентов с помощью иммуноблот-тинга и других специфических реакций (ИФА, РИФабс), проведенное через 2 недели после первого обследования, позволило установить ложный характер серопозитивности. Таким образом, специфичность линейного иммуноблоттинга при использовании диагностикума «INNO-LiaTM Syphilis Score» составила 98%.

Выводы: результаты проведенных исследований позволяют рекомендовать применение иммуноблоттинга на ранних стадиях сифилитической инфекции в качестве дополнения к общепринятым методам диагностики в следующих клинических ситуациях: на ранних стадиях инфекции при обследовании лиц, бывших в половом контакте с больными сифилисом; при обследовании пациентов с подозрением на первичный сифилис при отрицательных результатах стандартных серологических реакций (РМП, РСК) и высоком риске заражения сифилисом; для подтверждения диагноза сифилиса скрытого раннего при противоречивых результатах классических серологических методов и необходимости проведения дифференциальной диагностики с ложнопо-ложительными результатами серологических реакций на сифилис.