Флюоресцентная контактная микроскопия in vivo в диагностике базальноклеточного рака кожи

Побилат А.Е., Прохоренков В.И.

Красноярская государственная медицинская академия им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого,

г. Красноярск

В структуре злокачественных эпителиальных новообразований кожи преобладает

базально-клеточный рак кожи. Его диагностика базируется на данных клинической картины,

полученной при визуальном наружном осмотре пациента, дерматоскопии. Визуальная

диагностика носит субъективный характер, четкие дерматоскопические критерии разработаны только для пигментных форм. Общепризнанной является морфологическая

верификация базальноклеточного рака: цитологическое и гистологическое исследования.

Цитологическое исследование относится к ранней диагностике, но не всегда является

достаточно информативным для постановки окончательного диагноза, т.к. материал,

полученный при соскобе, может не содержать опухолевых клеток, оценка осложняется и

при наличии выраженного воспаления, некроза в очаге. Гистологическое исследование является «золотым стандартом», но срок получения результатов составляет не менее 10 дней

и, в большинстве своем, анализу подвергается операционный материал уже совершенного

хирургического вмешательства

В настоящее время во всем мире ведется активный поиск неинвазивных методов, позволяющих провести раннюю диагностику. Для выявления рака кожи эффективна

фотодинамическая диагностика: исследование, основанное на способности к

специфическому накоплению фотосенсибилизатора или индукции образования эндогенных

порфиринов в ткани опухоли с последующей флюоресценцией при облучении светом

определенной длины волны. Флюорохром акридиновый оранжевый, проникая в живую клетку специфически связывается со структурами, содержащими нуклеиновые кислоты. С 1956

г. этот метод используется при диагностике раковых клеток in vitro, мы не встретили описаний применения акридинового оранжевого in vivo для диагностики рака кожи.

Мы впервые предлагаем к использованию метод комплексной флуоресцентной диагностики базальноклеточного рака кожи, заключающийся в последовательном топическом

нанесении флюорохрома акридинового оранжевого и фотосенсибилизатора 5 – аминолевуленовой кислоты (Заявка на изобретение № 2008146948 «Способ флюоресцентной диагностики базальноклеточного рака кожи», приоритет от 27.11.2008 г.).

Больному с подозрением на базальноклеточный рак кожи на область поражения

наносят флюорохром акридиновый оранжевый в концентрации 1:5000 с последующим

изучением очага контактными объективами ЛК 10*0,40 и ЛК 25*0,75 в режиме флуоресценции

источником оптического излучения с получением 2-х мерного флуоресцентного изображения.

Определяют опухолевые комплексы базальноклеточного рака кожи по участкам скопления

интенсивно флуоресцирующих клеток на фоне зеленого свечения межклеточного

вещества и коллагеновых волокон. Затем на область поражения локально наносят

фотосенсибилизатор со способностью к индукции избирательной продукции эндогенного

протопорфирина IX в опухолевой ткани: 20% мазь 5-аминолевулиновой кислоты из расчета

0,1 г на 1 см. Мазь наносят под светонепроницаемую повязку на 2 часа. После удаления мази

с поверхности кожи на область поражения устанавливают контактный объектив ЛК 10*0,40,

исследование проводят в том же режиме флуоресценции. Выявляют специфическое для

опухолевой ткани свечение. ФД проводят в режиме флуоресценции (возбуждающий фильтр

ФС-1(4), запирающий фильтр ЖС – 18, ЖС – 19, световыделительная пластина зеленая,

с областью пропускания 480-700 нм, контактные объективы ЛК 10*0,40 и ЛК 25*0,75) на

установке, собранной на базе выпускаемого ЛОМО (Санкт-Петербург) микроскопа серии

ЛЮМАМ И3, а также телеметрического устройства, снабженного телевизионной камерой,

трансформирующей микроизображение в видеосигнал, записываемый видеоустройством и

наблюдаемый на экране монитора персонального компьютера.

Преимущества метода:

1) Оптимизация ранней диагностики базальноклеточного рака.

2) Отсутствие системной кожной фототоксичности, ввиду топического применения

фотосенсибилизатора.

3) Использование флюорохрома акридинового оранжевого позволило разработать

дополнительные диагностические критерии.

4) Последовательное использование двух препаратов позволило добиться флюоресцентного контраста 1: 10 опухоль - здоровая ткань в довольно короткие сроки (2 часа).

Показания для использования: подозрение на базальноклеточный, метатипический рак

кожи; рецидивы рака кожи. Способ применен у 120 больных с 144 очагами базальноклеточного

рака кожи, в 143 случаях диагноз подтвержден морфологически. Диагностическая специфичность составила – 90,91, точность – 95,11, чувствительность – 99,31.