Диагностика заболеваний, ассоциированных с генитальными микоплазмами, с применением культурального экспресс-теста и полимеразной цепной реакции

Сбитнева Н.Н., Кириченко Т.А., Перевалова Е.Ю., Шилова В.П., Бейкин Я. Б.

Институт иммунологии и физиологии УрО РАН, Клинико-диагностический центр, г. Екатеринбург

Цель: сравнительный анализ метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) и культурального экспресс-теста, оценка эффективности их комплексного применения для диагностики генитальных микоплазм. Материалы и методы: обследовали пациентов ЛПУ г. Екатеринбурга детородного возраста (женщины 17–44 лет, мужчины — 28–40 лет). Клинический материал (соскобы из уретры, эндоцервикального канала и влагалища) исследовали на Mуcoplasma hominis и Ureplasma urealyticum по разработанному алгоритму: детекцию и идентификацию ДНК микоплазм проводили методом ПЦР (тестсистемы фирмы «АмплиСенс», Москва); в положительных пробах определяли концентрацию микоплазм (титр от 102 КОЕ/мл и выше) и их чувствительность к антибиотикам (доксициклину, джозамицину, офлоксацину, эритромицину, тетрациклину, ципрофлоксацину, азитромицину, кларитромицину, пристинамицину) с применением культурального экспресс-теста Mycoplasma IST 2.(фирма BioMeriux, France).

Результаты: указанными методами исследовали материал от 81 пациента на U. urealyticum и 71 — на M.hominis. Совпадение результатов исследований культуральным экспресс-тестом и ПЦР составило 88,9% для U.urealyticum и 85,9% — для M.hominis. Положительные результаты были получены в 60 пробах на U.urealyticum и только в 1 пробе — на M. hominis. Имели место случаи выявления микоплазм только одним из используемых методов. Так, U.urealyticum и M.hominis была выявлена в 9,9 и 9,8 процента случаев, соответственно, только методом ПЦР, а в 1,2 и 4,2 % — только культуральным экспресс-тестом Mycoplasma IST 2. При отрицательных результатах ПЦР, культуральным методом в 2 пробах была выявлена U.urealyticum, а в 4 пробах — M.hominis в количестве 10² КОЕ/мл (концентрация до 10³ КОЕ/мл является нормой).

Несоответствие результатов диагностики M.hominis и U.urealyticum, полученных указанными выше методами, может быть связано как с низкой концентрацией микроорганизмов в пробе, чувствительностью и специфичностью используемых тест-систем, так и нарушением правил взятия, транспортировки и хранения клинического материала. Изучение антибиотикограмм показало, что наибольшей активностью в отношении U.urealyticum обладают тетрациклин (93%), доксициклин (96%), макролиды: джозамицин (81%) и кларитромицин (59%), тогда как при смешанной инфекции U. urealyticum и M.hominis эффективными являются только макролиды.

Использование комплекса лабораторных методов для диагностики генитальных микоплазм дает возможность оценки эф-фективности проводимой антибактериальной терапии. Так, применение с 2005 г. теста Mycoplasma IST 2 для количественной оценки микоплазм и определения их чувствительности к лекарственным препаратам позволило повысить эффективность лечения микоплазмозов в 2005–2006 гг. на 11-12% по сравнению с 2004 г.

Выводы: показана высокая диагностическая значимость метода выявления ДНК микоплазм по сравнению с культуральным экспресс-тестом (на 8,6% в случае обнаружения U.urealyticum и на 5,6% — M.hominis) и высокая эффективность культурального теста Mycoplasma IST в определении степенипатогенности микоплазм (количественная оценка), а также их чувствительности к антибиотикам.

На основании полученных данных был разработан оптимальный алгоритм диагностики генитальных микоплазм урогени-тального тракта: на первом этапе выявление ДНК M.hominis и U.urealyticum методом ПЦР с последующим определением их концентрации (титра) и чувствительности к антибиотикам.

Таким образом, для диагностики M.hominis и U.urealyticum, оценки их клинической значимости и адекватного выбора ан-тибиотикотерапии необходимо комплексное использование культурального экспресс-теста и молекулярно-биологических методов исследований.