ЗНАЧЕНИЕ ПРЕАНАЛИТИЧЕСКОГО ЭТАПА В ДИАГНОСТИКЕ УРОГЕНИТАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ ЖЕНЩИН МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ

Липова Е.В., Болдырева М.Н., Витвицкая Ю.Г., Чекмарев А.C.

Курс лабораторной диагностики и лабораторной микологии при кафедре дерматовенерологии и клинической микологии ГОУ ДПО РМАПО, г. Москва; ГПУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России, г. Москва

Цель: Изучить значение преаналитического этапа в исследовании биоты урогенитального тракта женщин методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР РВ).

Материалы и методы: Методом ПЦР РВ исследовано 186 (100%) образцов, полученных из уретры, влагалища и цервикального канала шейки матки женщин репродуктивного возраста, обратившихся с лечебной или профилактической целью в КВД г. Москвы. Проведен сравнительный анализ эффективности метода ПЦР РВ в зависимости от техники получения клинического образца для исследования. Оценкой качества получения биопробы служило количество ДНК эпителиальных клеток, содержащихся в исследуемом образце. На основании проведенных ранее исследований было рассчитано абсолютное значение показателя контроля взятия материала (КВМ), свидетельствующее о достаточном количестве материала в исследуемой пробе. Оптимальная величина этого показателя должна составлять не менее 10 геномной ДНК человека. При величине показателя КВМ, меньшей, чем 10, результат ПЦР анализа биоты считается недостоверным и требует повторного взятия биоматериала.

Результаты: Из 186 (100%) образцов 133 (71,5%) пробы были получены в соответствии со стандартами техники взятия клинического образца, 53 (28,5%) — произвольно, дерматовенерологами различных КВД. Объективная оценка достаточности биоматериала в исследуемой пробе на основании показателя КВМ продемонстрировала, что даже при условии соблюдения стандартов получения клинического образца (133; 100%), в 17,3% (n = 23), почти каждая пятая проба не пригодна для исследования, т.к. показатель КВМ составлял менее 10. Соответственно абсолютное число микроорганизмов, идентифицируемых в данной пробе, не может иметь клинического значения. Произвольный способ получения биопроб (53; 100%) увеличивает число неадекватных исследований ПЦР РВ в 3,7 раза по сравнению со стандартными способами получения клинического образца, что затрудняет клиническую интерпретацию результатов. При этом КВМ меньше 10 составляет более половины исследованных образцов — 64,2%.

Выводы: Установлено, что выполнение протокола преаналитического этапа исследования ПЦР РВ на исследовании биоты урогенитального тракта повышает эффективность лабораторного анализа в 3,7 раза в сравнении с произвольной техникой получения биопроб. Показатель КВМ менее 10 свидетельствует о неадекватности взятия биопробы для исследования методом ПЦР РВ (в этом случае), и результат анализа не имеет клинического значения.