Разработка первого отечественного контрольного штамма Neisseria gonorrhoeae

Аль-Хафаджи Н., Вахнина Т.Е., Полевщикова С.А., Соломка В.С.

ФГУ ЦНИКВИ Росмедтехнологий, г.Москва

Цель: получение контрольного штамма возбудителя гонококковой инфекции Neisseria gonorrhoeae.

Материалы и методы: материалом исследования являлись клинические изоляты N. gonorrhoeae, выделенные от пациентов с клинически и лабораторно подтвержденным диагнозом неосложненной конокковой инфекции. При выделении и аттестации штаммов N. gonorrhoeae были применены регламентированные методы исследования: бактериоскопический, культуральный, методы видовой идентификации, определение чувствительности N. gonorrhoeae к антибактериальным препаратам, методы генетического типирования.

Результаты: в отделе лабораторной диагностики ИППП и кожных болезней ФГУ «ЦНИКВИ Росмедтехнологий» в рамках выполнения подпрограммы «О мерах по предупреждению дальнейшего распространения заболеваний, передаваемых половым путем» Федеральной целевой программы «Предупреждение и борьба с заболеваниями социального характера (2002-2006 гг.)», проведена работа по созданию и регистрации первого отечественного контрольного штамма N. gonorrhoeae. Контрольный штамм N. gonorrhoeae был получен из клинического материала (соскоб слизистой оболочки уретры) больного неосложненной гонококковой инфекцией, жителя г. Санкт-Петербурга, до начала его лечения антимикробными препаратами. Штамм был выделен на плотной селективной питательной среде GC II Agar Base с питательными добавками «Isovitalex», бычьим гемоглобином и селективной добавкой «VCAT» (компания « Becton Dickinson», США), в условиях инкубации в термостате в атмосфере повышенной концентрации углекислого газа (8% — CO2) при температуре 35,5°С. Рост культуры был отмечен через 24 часа. В результате исследования свойств выделенной культуры путем окраски мазков по Граму, постановки оксидазного теста, определения ферментативногопрофиля микроорганизма на приборе BBL-Crystal (Becton Dickinson, США) установлена его видовая принадлежность — N. gonorrhoeae.

При определении профиля антибиотикорезистентности методом серийных разведений в агаре было установлено, что данный штамм чувствителен по отношению к пенициллину (МПК 0,015 мг/мл), тетрациклину (МПК 0,12 мг/мл), ципрофлоксацину (МПК 0,002 мг/мл), спектиномицину (МПК 2 мг/мл) и цефтриаксону (МПК 0,002 мг/мл).

Изучения генетического профиля штамма гонококка подтвердило отсутствие мутаций, ответственных за развитие антибиотикоустойчивости.

Штамм был депонирован в коллекции культур микроорганизмов ГИСК им. Л.А. Тарасевича, для его государственной регистрации была подготовлена научно-техническая документация.

Заключение: таким образам, в ходе выполнения комплексной работы по мониторингу свойств клинических изолятов N. gonorrhoeae, циркулирующих среди больных в различных регионах Российской Федерации, был получен первый отечественный контрольный штамм N. gonorrhoeae, который может быть использован для осуществления внутреннего и внешнего контроля качества лабораторных исследований в диагностике гонореи. Заявленные свойства позволяют рекомендовать его применение в качестве эталонного штамма при проведении видовой идентификации N. gonorrhoeae и определении чувствительности N. gonorrhoeae к антимикробным препаратам.