Генетические различия штаммов Mycoplasma hominis, выделенных от пациенток с воспалительными заболеваниями урогенитального тракта

Н. П. Евстигнеева, Ю. Н. Кузнецова, Н. М. Герасимова, А. Г. Сергеев, О. О. Михайлова, А. В. Резайкин, Л. И. Юровских

Уральский НИИ дерматовенерологии и иммунопатологии, г. Екатеринбург

Предметом дискуссий является роль микоплазм и других условно­патогенных микроорганизмов в этиологии ВЗОМТ. Вопрос о том, какие усло­вия являются решающими для реализации патогенного потенциала условно­патогенных микоплазм, до настоящего времени остается невыясненным.

Целью исследования явилось определение генетических различий штам­мов M. hominis, выделенных от женщин с воспалительными заболеваниями репродуктивных органов различной степени тяжести.

Амплификацию выбранного участка проводили с помощью полимераз­ной цепной реакции (ПЦР) с олигонуклеотидными праймерами Bak11W-5' AGA GTT TGA TCA TGG CTC AG 3' и Bak2-5' GGA CTA CCA GGG TAT CTA AT 3'. Синтез олигонуклеотидных праймеров произведен в ЗАО «Синтол» (Москва). Первичную структуру ДНК определяли методом прямого секвени­рования по прямой и обратной последовательностям с праймерами Bak11W и Bak2 на автоматическом генетическом анализаторе ABI Prism 310 (Applied Biosystems, США) с использованием реакционной смеси ABI Prism BigDye Terminator Cycle Sequencing Kit v.3.0 (Applied Biosystems, США).

В результате молекулярно-генетического анализа штаммов M. hominis, выде­ленных в диагностически значимых титрах (104 КОЕ/мл и более) от 59 пациен­ток в возрасте от 16 до 52 лет (28,3±8,7 года) с воспалительными заболевания­ми, ассоциированными с M. hominis, в 29 случаях (49,2 %) была выявлена ранее не описанная мутация – замена тимина на цитозин в позиции 179 гена 16S рРНК.

При сравнительном анализе результатов клинического и лабораторно­го обследования в группах женщин, инфицированных штаммами M. hominis, имеющими и не имеющими указанную мутацию, было обнаружено, что му­тантные штаммы M. hominis в 15,7 раза чаще диагностировались у пациенток с воспалительными заболеваниями верхних отделов урогенитального трак­та: эндометритом, сальпингоофоритом и/или спаечным процессом. Штаммы

M. hominis, у которых данная мутация отсутствовала, достоверно чаще выяв­лялись у пациенток с воспалительными заболеваниями нижнего отдела уро­генитального тракта. Было установлено, что мутантные штаммы M. hominis чаще выявлялись у пациенток старшего репродуктивного возраста, с мало­симптомным течением воспалительного процесса урогенитального трак­та. По чувствительности/устойчивости к антибиотикам мутантные штаммы

M. hominis не отличались от штаммов, не имеющих мутации.

У пациенток с выявленными мутациями штаммов M. hominis в большин­стве случаев (81,8 %) при посеве вагинальных образцов отсутствовали или были в недостаточном количестве (менее 103 КОЕ/мл) лактобактерии. У паци­енток с отсутствием мутаций штаммов M. hominis лактобактерии отсутство­вали или были в недостаточном количестве в 58,3 % случаев.

Таким образом, несмотря на то, что M. hominis считается условно­патогенным возбудителем, проведенные исследования выявили генетиче­скую неоднородность циркулирующих штаммов M. hominis и позволяют сде­лать обоснованное предположение о том, что штаммы M. hominis, имеющие мутацию в гене 16S рРНК, обладают более высоким патогенным потенциалом по сравнению с «дикими» немутантными штаммами, что требует дифферен­цированного подхода к лечению.