Кубанов А.А., Катунина О.Р., Абрамова Т.В., Миченко А.В.
Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии Минздрава России, Москва
Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава России, Москва
<p>Актуальность. Буллезные дерматозы представляют собой группу хронических аутоиммунных заболеваний кожи и слизистых оболочек, имеющих общие патогенетические механизмы, характеризующиеся формированием аутоантител против специфических молекул адгезии десмосом кератиноцитов, базальной мембраны и дермо-эпидермального соединения. В ряде случаев клинически сложно провести дифференциальную диагностику между различными буллезными дерматозами. Особую сложность представляет дифференциальная диагностика истинной акантолитической пузырчатки и буллезных пемфигоидов на ранних стадиях развития, при изолированном поражении слизистой оболочки полости рта. Вместе с тем, ранняя и точная диагностика очень важна для своевременного назначения адекватной терапии<br />
Цель. Изучить возможность использования конфокальной лазерной сканирующей микроскопии для дифференциальной диагностики истинной акантолитической пузырчатки и буллезного пемфигоида.<br />
Материал и методы. Под наблюдением находился 31 пациент с буллезными дерматозами (14 мужчин и 17 женщин). Возраст пациентов варьировал от 17 до 75 лет (средний возраст 55,37±15,6 года). У 24 диагностирована истинная акантолитическая пузырчатка (в том числе вульгарная – у 19, себорейная – у 5), у 7 – буллезный пемфигоид. <br />
Диагноз истинной акантолитической пузырчатки и буллезного пемфигоида устанавливали на основании данных клинической картины, результатов цитологического (наличие в мазках-отпечатках акантолитических клеток), гистологического исследования. Контрольную группу составили 10 здоровых добровольцев (от 29 до 60 лет, средний возраст 41,6±13,2года).<br />
Реакция непрямой иммунофлюоресценции проводилась на замороженных, фиксированных в ацетоне срезах с использованием первичных моноклональных антител к IgG (рабочее разведение 1:400) и вторичных флюоресцирующих антител. Срезы заключали под покровное стекло во флюоресцирующую среду, содержащую DAPI. Препараты анализировали на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе Olympus IX81S1F-S (Германия) при увеличении объектива x60, x100. Флюоресцентная микроскопия проводилась на микроскопе Leica DM 6000 В. <br />
Результаты. При исследовании биоптатов, полученных от больных истинной акантолитической пузырчаткой (n=24), при помощи конфокального лазерного микроскопа и флюоресцентной микроскопии выявлено характерное отложение IgG в межклеточных пространствах шиповатого слоя эпидермиса; дермальные отложения иммуноглобулина G отсутствовали. В биоптатах больных буллезным пемфигоидом (n=7) отложения IgG наблюдались вдоль базальной мембраны. При окрашивании биоптатов кожи здоровых добровольцев (n=10) отложения IgG обнаружены не были. <br />
Метод конфокальной лазерной сканирующей микроскопии позволил получить более четкий и контрастный сигнал от флуоресцирующих антител в биоптатах по сравнению с флуоресцентной микроскопией при исследовании биоптатов, полученных от больных истинной акантолитической пузырчаткой и буллезным пемфигоидом.<br />
Заключение. Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия обеспечивает выявление и определение характерных для буллезных дерматозов аутоантител класса IgG в межклеточном пространстве эпидермиса, позволяет получать изображения с бóльшей четкостью и контрастностью в сравнении с флуоресцентной микроскопией и является эффективным методом дифференциальной диагностики истинной акантолитической пузырчатки и буллезного пемфигоида.</p>